雙軸細(xì)胞拉伸儀是研究細(xì)胞在受到機(jī)械壓力、拉力或其它機(jī)械刺激時(shí)的各種形變,目前已經(jīng)成為一門前沿科學(xué)研究項(xiàng)目,為此科學(xué)家研發(fā)出很多裝置用于拉伸細(xì)胞,它可以在體外環(huán)境模擬體內(nèi)的拉伸狀態(tài)等條件來(lái)滿足以上細(xì)胞的生長(zhǎng)。
雙軸細(xì)胞拉伸儀主要實(shí)現(xiàn)模擬細(xì)胞在人體內(nèi)受到的生理牽張環(huán)境刺激下的細(xì)胞培養(yǎng),也可以用于模擬非生理狀態(tài)下受到的牽張刺激,用來(lái)研究不同應(yīng)變狀態(tài)下的細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)。牽張應(yīng)變?cè)谌梭w內(nèi)目前主要有如心肌、肌肉纖維、血管舒張收縮等自主動(dòng)作對(duì)自身及周圍細(xì)胞形成影響或者由外部作用如按摩,推拿等外力施加而產(chǎn)生對(duì)細(xì)胞的影響。
視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)是視網(wǎng)膜的基本組成部分,在視覺功能中起著至關(guān)重要的作用。視網(wǎng)膜色素上皮的結(jié)構(gòu)和功能受損會(huì)導(dǎo)致多種視網(wǎng)膜疾病,目前尚無(wú)治療這些疾病的方法。因此,研究視網(wǎng)膜色素上皮的發(fā)育、功能與病理生物學(xué)之間的關(guān)系,對(duì)預(yù)防和治療視網(wǎng)膜疾病具有重要意義。
視網(wǎng)膜下纖維化是導(dǎo)致年齡相關(guān)性黃斑病變視力喪失的原因之一,抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)治療是目前對(duì)于濕性年齡相關(guān)性黃斑變性標(biāo)準(zhǔn)治療方案。實(shí)驗(yàn)計(jì)劃通過(guò)觀察牽拉力誘導(dǎo)下RPE細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá)來(lái)探索機(jī)械應(yīng)力對(duì)其形成產(chǎn)生的作用。
設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn):根據(jù)不同大小牽拉力分為對(duì)照組(無(wú)牽拉力組)、A組(20%形變組)、B組(10%形變組)、C組(5%形變組)。各組依照不同的時(shí)間點(diǎn)收取樣本進(jìn)行檢測(cè)。應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)各組不同時(shí)間點(diǎn)(0、24、48h)VEGFAmRNA的表達(dá)情況,蛋白印跡法檢測(cè)(0、24、48h)VEGFA-165的表達(dá)以及ELISA方法檢測(cè)(0、12、24、36、48h)細(xì)胞上清液中VEGFA的分泌。